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转自Abcam公众号

用各种各样的抗体做生物学实验的小伙伴们，经常会碰到实验结果中背景较高的问题，常常会使结果图片不够清晰和美观。想要降低实验背景，听听来自剑桥大学研究员的推荐。

将非特异性结合和高背景染色降至最低。

“了不起的二抗。特异性高，信号强。高度稀释后依然有足够的灵敏度。我向大家推荐这种抗体。” ——英国剑桥大学的研究员

什么是预吸附？

预吸附（也称交叉吸附）是一种附加的纯化步骤，用于提高抗体的特异性。包含二抗的溶液会流经一个基质柱，基质柱中包含了从潜在交叉反应的物种中获取的固定血清蛋白。非特异性二抗将保留在柱中，而特异性高的二抗将通过。

预吸附（交叉吸附）二抗的优势

在处理组织和细胞时我们始终建议大家使用预吸附（交叉吸附）二抗，降低非特异性背景。除了上述目的，这些抗体还在以下方面尤为有用：

•多色实验：当同时使用多个一抗及其对应的二抗时，应使用产生其他一抗的物种预先吸附某种二抗，以降低二抗和其他一抗之间发生交叉反应的风险。

举例：利用在兔和小鼠中分别产生的一抗做双染色实验时，请使用已用小鼠血清预吸附的抗兔 Alexa Fluor® 488二抗，和已用兔血清预吸附的抗小鼠 Alexa Fluor® 647二抗。

•对含有大量内源性免疫球蛋白(Igs) 的样本进行 IHC 实验：二抗应使用与样本源物种同样的物种进行预吸附，以减少二抗和免疫球蛋白交叉反应的风险。

举例：对人体组织和细胞系进行染色时，使用已用人体血清预吸附的抗小鼠 HRP二抗。

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